限制性核酸内切酶的星号活性是什么(限制性核酸内切酶)
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1、限制性核酸内切酶是基本克隆中最重要的工具酶,主要从原核细胞中提取.它能从双链DNA内部特异位点识别并且裂解磷酸二酯键而将双链DNA分子断开并形成3/—OH和5/—P末端.已从几百种不同的微生物中纯化得到了近千种不同的限制性核酸内切酶.大部分限制性核酸内切酶的特一性识别序列是由4~6碱基对组成的回文结构.大多数限制性内切酶是错位切割双链DNA,产生粘性末端,部分酶则沿对称轴切割DNA而产生平端. 如EcoRI切割后产生5|粘性末端: 5/—C↓AATT C—3/ 5/—C AATTC—3/ 3/—C TTAA ↑ C—5/ → 3/—CTTAA + C—5/ PstI切割后产生3/粘性末端: 5/—C T CCA↓C—3/ 5/—CTCCA C—3/ 3/—C↑ ACCTC—5/ → 3/—C + A CCCT C—5/ Sma I沿对称轴切断DNA,产生平端或钝端: 5/—CCC↓CCC—3/ 5/—CCC CCC—3/ 3/—CCC ↑CC C—5/ → 3/—CCC + CCC —5/ 有些限制性内切酶来源不同,但能识别和切割同一位点,称为同功异源酶.如BamH I和Bst I(C↓CATCC),Xho I和PaeR7(C↓TCCAC),这些同功异源酶可以互相代用. 有些限制性内切酶识别序列不同,但是产生相同的粘性末端,称为同尾酶,如BamH I(C↓CATCC)和San3AI(N↓CATCN).由此产生的DNA片段可借粘性末端相互连接,使DNA重组,在操作时具有更大的灵活性. 限制性酶主要分为三型:I型酶在识别序列中切点位置不定;Ⅲ型酶则动力学行为复杂,不易掌握反应条件;仅Ⅱ型酶在识别序列中特定位点切割DNA,最为人们所重视和常用. 限制性酶的活性单位是指在最适条件下,于37℃作用一小时,完全消化1ugDNA(一般指λ噬菌体DNA)所需的酶量. ………………
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3、详细资料请参考:on
4、http://product.bio1000.com/101074/
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