dna甲基化的检测方法(dna甲基化检测方法)
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1、方法概括起来可分为三类:基因组整体水平的甲基化检测、基因特异位点甲基化的检测和新甲基化位点的寻找1) 基因组整体水平甲基化分析 a) 高效液相色谱柱(HPLC)及相关方法 b) SssI 甲基转移酶法 c) 免疫化学法 d) 氯乙醛法2) 特异性位点的DNA甲基化的检测 a) 甲基化敏感性限制性内切酶(MS-RE)-PCR/Southern法 b) 直接测序法 c) 甲基化特异性的PCR d) 甲基化敏感性单核苷酸引物延伸(Ms-SnuPE) e) 结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法(combined bisulfite restriction analysis,COBRA) f) 甲基化敏感性单链构象分析 g) 甲基化敏感性变性梯度凝胶电泳 h) 甲基化敏感性解链曲线分析(methylation-specific melting curve analysis,MS-MCA) i) 荧光法(Methylight) j) DNA微阵列法 k) 甲基化敏感性斑点分析(methylation sensitive dot blotassay,MS-DBA) l) 甲基化特异性多连接依赖性探针扩3) 甲基化新位点的寻找 a) 限制性标记基因组扫描(restriction landmark genomic scanning,RLGS) b) MBD(Methyl-CpG binding domain column chromatography,甲基化结合区)柱层析法 c) 联合甲基化敏感性限制性内切酶的MBDDNA甲基化检测: Southern Blot杂交、 Bisulfite Sequencing and McrBC-PCRMSP法、BSP-克隆测序法、HRM法检测,详细了解可以找相应的公司,据我了解 阅微基因 就有相应的技术服务,需要的话可以了解。
2、Septin9基因甲基化检测技术,是由德国EIP公司(Epigenomics)研发的一项基于基因靶点是否出现甲基化表达变化的肿瘤超早期液体活检技术,该技术在与欧洲多家权威医疗机构进行临床试验后,获得了欧盟CE认证,在欧洲被广泛运用到肿瘤的超早期筛查和临床诊断中。
3、之后德国EIP公司将技术授权给美国博尔诚公司(BioChain Institute Inc.)共同开发针对结直肠癌、胃癌、肝癌、食管癌、肺癌等癌症种类的检测试剂,并且与美国德州大学MD安德森癌症中心(UT MDAndersonCancerCenter)共同进行临床试验,在美获得了美国药监局FDA认证,该项技术于2016年被列入了美国疾病预防工作委员会(USPSTF)的筛查项目指南中,作为美国40岁以上人群的常规癌症超早期筛查项目之一。
4、2014年美国博尔诚进入中国后,在北京成立博尔诚医学检验公司,与国内几十家顶级医院进行临床合作试验,试验人群超过100万例,并于2015年8月获得国家食药监局CFDA认证,目前该项目已进入到国内多家顶级三甲医院中(北京301医院、四川省人民医院、西安西京医院、中日友好医院、中南大学湘雅医院等),被运用于癌症超早期以及早期的筛查,具有重要的临床诊断学意义。
5、同时也是目前国内最先进的癌症早期筛查技术之一,只需10-13毫升血液就可以查出体内的肿瘤各阶段变化,对于肿瘤的早筛、早诊断、早治疗有重大的帮助和意义。
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